Trong phân tích hàm lượng protein của mẫu ngũ cốc bằng phương pháp Kjeldahl, tiến hành các bước sau:
Phân hủy mẫu:
Cân 1,3725 g bột ngũ cốc, cho vào bình cầu chứa 18 mL $H_{2}S{O}_4$ đặc, thêm xúc tác và đun sôi trong 2,5 giờ. Giả sử toàn bộ nitrogen trong protein được chuyển thành $N{H}_4^{+}$.
Giải phóng và thu $N{H}_3$:
Sau khi làm nguội, thêm 250 mL nước, 30,0 g NaOH, chưng cất và dẫn khí $N{H}_3$ vào 60,0 mL dung dịch $HCl$ 0,0825 M.
Chuẩn độ:
Chuẩn độ lượng acid dư bằng NaOH 0,0610 M, dùng chỉ thị methyl red; thể tích NaOH tiêu tốn là 41,20 mL.
Biết hàm lượng nitrogen trong protein của ngũ cốc là 16,80%, xác định phần trăm khối lượng protein trong mẫu là h%.

(AI giải đề cho tôi)
a) Đúng: protein là cao phân tử, các amino acid liên kết bằng liên kết amide (peptide). b) Đúng: trong bước phân hủy Kjeldahl, H2SO4 đặc phân hủy chất hữu cơ, chuyển toàn bộ nitrogen về dạng NH4+. c) Sai: HCl phải được dùng DƯ (dẫn vào lượng HCl dư) để thu được hoàn toàn NH3; sau đó chuẩn độ lượng acid dư bằng NaOH. Nếu dùng vừa đủ thì khó đảm bảo NH3 được hấp thụ hết và không thể chuẩn độ ngược, dễ gây sai số. d) Tính toán: n_HCl ban đầu = 0,0825 × 0,0600 = 4,95·10⁻³ mol; n_NaOH = 0,0610 × 0,04120 = 2,5132·10⁻³ mol = n_HCl dư; n_HCl phản ứng = 4,95·10⁻³ − 2,5132·10⁻³ = 2,4368·10⁻³ mol = n_NH3 = n_N; m_N = 2,4368·10⁻³ × 14 = 0,0341152 g; m_protein = 0,0341152/0,168 = 0,2030667 g; h = 0,2030667/1,3725 × 100 = 14,794% ≈ 14,8%. Khẳng định d đúng.
a) (AI giải đề cho tôi)
Protein là hợp chất cao phân tử gồm các đơn vị amino acid liên kết với nhau bằng liên kết amide (liên kết peptide).
b) (AI giải đề cho tôi)
Trong bước phân hủy Kjeldahl, H2SO4 đặc (với xúc tác) phân hủy các hợp chất hữu cơ, chuyển toàn bộ nitrogen trong protein về dạng NH4+.
c) (AI giải đề cho tôi)
HCl phải được dùng dư để hấp thụ hoàn toàn NH3, sau đó chuẩn độ lượng acid dư bằng NaOH. Dùng vừa đủ sẽ không đảm bảo thu hết NH3 và không thể chuẩn độ ngược, gây sai số.
d) $$n_{\text{HCl, ban đaˆˋu}}=0,0825\times 0,0600=4,95\cdot 10^{-3}\text{ mol}$$
$$n_{\text{NaOH}}=0,0610\times 0,04120=2,5132\cdot 10^{-3}\text{ mol}$$
$$n_{\text{HCl dư}}=2,5132\cdot 10^{-3}\text{ mol}$$
$$n_{\text{HCl phản ứng}}=4,95\cdot 10^{-3}-2,5132\cdot 10^{-3}=2,4368\cdot 10^{-3}\text{ mol}$$
$$n_{N{H}_3}=2,4368\cdot 10^{-3}\text{ mol}$$
$$n_N=2,4368\cdot 10^{-3}\text{ mol}$$
$$m_N=0,0024368\times 14=0,0341152\text{ g}$$
$$m_{\text{protein}}=\frac{m_N}{0,168}=\frac{0,0341152}{0,168}=\frac{1523}{7500}\text{ g}$$
$$h=\frac{\frac{1523}{7500}}{1,3725}\times 100=14,8\%$$